Bu deneyde öğrenciler, E. coli ve plazmit DNA kullanarak bakteriyel dönüşümün biyolojik sürecini keşfedecekler . Aktivitenin sonunda öğrenciler, dönüştürülmüş bakteri hücreleri tarafından sergilenen kazanılmış özellikleri (ampisilin direnci ve floresan) gözlemleme ve analiz etme deneyimine sahip olacaklar.
• Bu zarif deneyle genetik mühendisliğini ve merkezi dogmayı keşfedin
• E. coli'yi pFluoroGreen ile dönüştürün - ampisilin direnci ve yeşil floresan protein genleri içeren bir plazmid
• LB-ampisilin plakaları kullanarak dönüştürülmüş hücreler için seçin ve dönüşüm verimliliğini hesaplayın
• Dönüştürülmüş farklı gen ekspresyonunu göstermek için IPTG'ye hücreler
• Yeni dönüşüm protokolü yüksek dönüşüm verimliliğine sahiptir = harika sonuçlar!
Grup boyutu:
10 laboratuvar grubu için
Zaman:
Kurulum - 50 dakika / Kuluçka - gece / Dönüştürme - 15 dakika
Kit İçeriği:
Talimatlar, BactoBeads ™ E. coli GFP Host, supercoiled pFluoroGreen ™ plazmid DNA, ampisilin, IPTG, CaCl 2 , Growth Additive, ReadyPour ™ Luria Broth Agar (steril), Luria Broth Medium for Recovery (steril), petri plakları (küçük), petri plakaları (büyük), plastik mikro uçlu transfer pipetleri, sarılı 10 ml pipet (steril), kürdanlar (steril), inokülasyon halkaları (steril), mikrosantrifüj tüpleri
Gerekli Cihaz ve Malzemeler:
Otomatik mikropipet (5-50 µl) ve uçlar, iki su banyosu (37ºC ve 42ºC), termometre, inkübasyon fırını (37ºC), pipet pompaları veya ampuller, buz, işaret kalemleri, bunsen brülörü, ısıtıcı, koruyucu eldivenler, uzun dalga UV ışığı
Depolama:
Bazı bileşenler buzdolabı ve dondurucu saklama gerektirir